用途:熱釋光測(cè)量?jī)x是研究光合作用的強(qiáng)有力的工具,是研究PSII電子傳輸?shù)挠行结?,廣泛應(yīng)用于除草劑對(duì)PSII的受體效應(yīng)、QA與QB穩(wěn)定性、光合放氧復(fù)合物(OEC)穩(wěn)定性及PSII總體完整性等,還用于光合突變個(gè)體的篩選等。
TL6000系列熱釋光測(cè)量?jī)x是針對(duì)研究PSII能量水平結(jié)構(gòu)而設(shè)計(jì)的。PSII反應(yīng)中心光誘導(dǎo)電荷分離導(dǎo)致儲(chǔ)存了吸收光能的激發(fā)電子對(duì)的累積。加熱誘導(dǎo)這些激發(fā)電子對(duì)的重組,從而引發(fā)光釋放,并在一定溫度范圍內(nèi)形成特異性熱釋光曲線。根據(jù)不同釋光曲線的形狀、峰位和峰值,可以研究分析關(guān)于特定激發(fā)電子對(duì)的能量穩(wěn)定性及PSII反應(yīng)中心功能等。TL200系列熱釋光測(cè)量?jī)x有三種不同型號(hào),測(cè)量范圍從-90°C到+190°C可選,使用范圍更寬,可以對(duì)低溫、高溫段熱釋光進(jìn)行研究。
原理:熱釋光(Thermoluminescence,縮寫(xiě)TL)是晶體受到輻射照射后,會(huì)產(chǎn)生自由電子,這些電子被晶格缺陷俘獲而積攢起來(lái),在加熱過(guò)程中以光形式釋放出來(lái)。其基本的實(shí)驗(yàn)過(guò)程是將葉片快速冷凍到某一溫度,之后給葉片一個(gè)足夠強(qiáng),但時(shí)間盡量短(一般<5μs)的單翻轉(zhuǎn)光(single turn-over ?ash),用于誘導(dǎo)每個(gè)PSII反映中心發(fā)生僅一次的電荷分離;然后逐漸升溫,同時(shí)測(cè)量葉片放出的熱釋光,繪制TL譜帶。
熱釋光研究中的一個(gè)主要工具是單次翻轉(zhuǎn)光閃,要求足夠強(qiáng)(光源強(qiáng)度高達(dá) 150 000 μmol(photons).m-2.s-1)和足夠短(典型 < 5 微秒)來(lái)誘導(dǎo)每一個(gè)PSII反應(yīng)中心發(fā)生一次,且僅一次的電荷分離。光閃的飽和效果可以通過(guò)QB段的強(qiáng)度來(lái)檢查,它應(yīng)該在首次光閃后達(dá)到最大,在2次光閃后不再增加。當(dāng)前許多實(shí)驗(yàn)中使用的氙燈光閃具有明顯缺陷——一個(gè)長(zhǎng)的持續(xù)發(fā)光,或者“閃光拖尾”,這會(huì)在某些PSII反應(yīng)中心中產(chǎn)生兩次的電荷分離(連擊)。雖然激光閃光能夠有效降低連擊,但不能消除。
TL6000系列熱釋光測(cè)量?jī)x使用能量足夠強(qiáng)的LED光源,所釋放5-10μs的方波脈沖能夠飽和所有的PSII反應(yīng)中心,其溫度控制單元可以在降溫后,再使樣品的溫度以0.1℃/sec到 2℃/sec的速率線性增加。不同的閃光序列及樣品處理能夠使樣品處于不同的能量狀態(tài),不同的溫度下釋放的光能源自光合機(jī)構(gòu)的不同結(jié)構(gòu)。分析釋光曲線的形狀、峰位和峰值,可以研究分析關(guān)于特定激發(fā)電子對(duì)的能量穩(wěn)定性及PSII反應(yīng)中心功能等。
特點(diǎn):
·不同型號(hào)可選,測(cè)量溫度范圍寬,從 -25 至 +200 °C;
·可變高光強(qiáng)光源(627nm)用于S狀態(tài)躍遷分析;
·可變長(zhǎng)時(shí)間光源(627nm)用于預(yù)定溫度下的照明;
·用于檢測(cè)熱釋光峰值檢測(cè)的靈敏光電倍增二極管;
·程序控制電子閥門(mén)保護(hù)光電倍增二極管;
·環(huán)境光保護(hù),確保測(cè)量都在標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室條件下進(jìn)行;
·測(cè)量室內(nèi)強(qiáng)制輸送空氣(僅TL 6000/ST);
·含電磁閥的液氮罐(僅TL 6000/ET);
應(yīng)用領(lǐng)域:
·光合機(jī)理研究——捕光色素復(fù)合體,PSII反應(yīng)中心,放氧復(fù)合物研究;PSII能級(jí)分析;原初反應(yīng)階段的內(nèi)在過(guò)程探測(cè);
·植物脅迫生理的早期檢測(cè)與診斷;
·植物病蟲(chóng)害相關(guān)研究;
·除草劑影響;
·對(duì)植物光合研究的完善補(bǔ)充;
系統(tǒng)組成:
主要有3部分組成:多功能控制單元、溫度調(diào)節(jié)控制單元和測(cè)量室。
多功能控制單元:根據(jù)用戶定義方案或已置實(shí)驗(yàn)程序運(yùn)行實(shí)驗(yàn),兩個(gè)輸入通道分別用于測(cè)量熱發(fā)光信號(hào)(TL信號(hào))和測(cè)量溫度。測(cè)量曲線有兩種顯示格式:時(shí)間/溫度和時(shí)間/TL,或者溫度/TL信號(hào)。
溫度調(diào)節(jié)控制單元:可以在-25°C 到 +200°C范圍內(nèi)以0.1°C的精確度控制樣品的溫度。系統(tǒng)前面板可以顯示實(shí)際的溫度,可以通過(guò)手動(dòng)或軟件調(diào)節(jié)溫度。有恒溫和溫度梯度兩種模式(0.1°C/sec到 2°C/sec線性變化);
測(cè)量室包含四個(gè)部分:光源、光電倍增管、A/D轉(zhuǎn)換器、具有溫度控制器的樣品盤(pán)。
1.光源由8個(gè)超亮發(fā)光二極管(λmax=630 nm)組成,發(fā)射的光閃強(qiáng)度高達(dá)150,000 μmol(photons). m-2.s-1以上,光閃持續(xù)時(shí)間最長(zhǎng)為150 μs(典型5-10us),光強(qiáng)和光閃持續(xù)時(shí)間通過(guò)軟件控制;
2. 光電倍增器可以探測(cè)從300到900nm范圍的光量子,從而測(cè)量熱發(fā)光信號(hào)和緩發(fā)熒光。光電倍增器包括自己的電源;
3.A/D轉(zhuǎn)換器用于光電倍增器的電流放大、軟件控制增益和數(shù)字化,放大器的時(shí)間反應(yīng)固定在50ms,以確定最小取樣周期到100ms;
技術(shù)參數(shù):
溫度控制范圍 | 標(biāo)準(zhǔn)溫度版TL 6000/ST:-25~+70℃; 擴(kuò)展溫度版TL 6000/ET:-100~200℃; |
控制模式 | 恒定;線性改變,1.5℃/秒~1.8℃/秒 |
過(guò)熱保護(hù) | 是 |
最小采樣周期 | 100毫秒 |
控制方式 | 手動(dòng)(恒溫),程序定義的溫度曲線 |
樣品盤(pán) | 鍍金銅; 標(biāo)準(zhǔn)版和低溫版:直徑14mm 高溫版:直徑22mm |
典型樣品 | 藻類、藍(lán)藻細(xì)菌懸浮液和葉圓片 |
光源 | 飽和脈沖光623nm,強(qiáng)度高達(dá)300000 μmol(photons)/m2/s; 光化光627nm,強(qiáng)度高達(dá)2000 μmol(photons)/m2/s; |
檢測(cè)器 | 可以通過(guò)軟件靈敏控制的光電倍增器 |
光譜響應(yīng) | 300~900 nm |
接通延遲 | 100毫秒 |
環(huán)境光保護(hù) | 提供 |
定制程序 | 可設(shè)定時(shí)間,專用語(yǔ)言和腳本 |
通訊端口 | 串口或USB |
軟件 | FluorWin3.7 |
供電 | 90~240V |